戊巴比妥钠的临床应用。该研究结果发表在国际杂志《柳叶刀肿瘤学杂志:实体瘤和转移性疾病的治疗进展和疗效评估(revman):2017年5月)上。这研究是一项随机对照试验,旨在评估瑞舒伐他汀联合阿托伐他汀治疗晚期非小细胞肺癌患者的安全性和耐受性。该研究纳入了来自美国、欧和日本的超过100名患者,年龄在40-75岁之间。
一:戊巴比妥钠麻醉小鼠
模式动物品系:SPF级Balb/C小鼠,健康,雄性,4~6W,体重为18g~20g。
实验分组:实验分六组:正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
实验周期:4-6 weeks
建模方法:
1. 烧伤造模过程: 戊巴比妥钠麻醉小鼠后,用剃毛器剃去小鼠背部毛,并使用硫化钠于背部进行脱毛处理至无毛。将小鼠四肢和尾部固定于超净台上,间隔排列,将水浸湿的带控制烧伤面积的纸片放在小鼠背部(2.0cm×3.5cm=7.0 cm2,占体表面积10%),用滴管滴加乙醇,浸满皮肤,打火机点燃,启动秒表计时,到时用湿布熄火,将小鼠放回鼠笼。需进行预实验确定合适的烧伤时间。 2. 烧伤后护理: 烧伤后当天,各组小鼠腹腔注射葡萄糖盐水0.3-0.4 mL,第2天灌胃牛奶0.2-0.3 mL。第3天,正常小鼠与烧伤小鼠各取1只处死,取材。治疗方式为:A、B组于伤口处涂抹药物,C组于伤口处均匀喷上喷剂。烧伤后7天内每天早晚各给药一次,厚度为1mm;第8天起每天给药一次。 3.取材: 于烧伤后2、7、14、30、45、60天分别处死A、B组各1只小鼠。处死小鼠之前,记录小鼠体重和创面的变化(拍大体照,尽可能每只鼠拍照的角度一致)。 取材:老鼠麻醉后摘眼球取血,提血清,置于-80度保存。烧伤创面分2份,一份置于福尔马林保存用于后期病理染色,另一份置于液氮快速冷冻置于-80度保存。
应用:疾病模型
模型评价: 皮肤观察: 观察伤处愈合情况,记录小鼠体重变化、创面愈合时间、感染情况、愈合后瘢痕情况,创面愈合率等,拍大体照,尽可能每只鼠拍照的角度一致。
组织病理学: HE染色:对皮肤进行病理检查和观察:将烧伤创面连同周边皮肤约0.5 cm取下,平铺于滤纸上,然后固定于10% 福尔马林内,纵向和横向切取宽约3-4 mm皮肤,按常规制备石蜡切片,切片厚度为5 μm,苏木素一伊红(HE)染色,用显微镜观察并照相。 IHC染色:取石蜡切片,进行Ki67染色。